康寧Matrigel基質 corning基質膠現(xiàn)貨供應，歡迎聯(lián)系華雅思創(chuàng)生物咨詢購買

在體內，基底膜是以細胞為基礎的薄層細胞外基質。康寧 Matrigel matrix 是從富含胞外基質蛋白的 EHS 小鼠腫瘤中提取的基底膜基質，其中含有約 60%層粘連蛋白、30% IV 膠原和 8%的巢蛋白?？祵?Matrigel matrix 還含有基底膜聚糖、TGF-?、表皮生長因子、類胰島素生長因子、組織纖溶酶原及其他生長因子。

包被涂層方法：

  康寧基底膜基質可以以幾種方式使用。薄層凝膠法適用于在凝膠頂部接種細胞，厚層凝膠法允許您在三位基質內培養(yǎng)細胞，薄層包被法(不凝膠化)給您提供了復雜的蛋白質層，您可以在其上培養(yǎng)細胞。您的選擇基于您想要實現(xiàn)的最終結果，無論是細胞生長、附著還是分化。

  注意：在康寧支持網(wǎng)頁上發(fā)布了具體的應用程序*?？祵幓啄せ|產(chǎn)品的蛋白質濃度是批次特異的并提供在分析證明書上。通過計算需要的特定蛋白濃度(mg/mL)獲得了稀釋康寧基底膜基質產(chǎn)品的一致結果。為了維持凝膠化的一致性，我們推薦不要將康寧基底膜基質稀釋到少于 3 mg/mL。請使用冰冷的無血清培養(yǎng)基來稀釋康寧基底膜基質。通過在冰上移液管上下吸液或渦旋小瓶來混合。

薄層凝膠法
  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質。使用預冷的移液管，將康寧基底膜基質混合至均勻。
  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上，以 50 μl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質。
  3. 將培養(yǎng)板放置在 37 °C ，30 分鐘。
  4. 如果有必要的話，請在使用無血清培養(yǎng)基輕柔漂洗前吸出未結合的材料。請確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。

厚層凝膠法
  1.  依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質。使用預冷的移液管，將康寧基底膜基質混合至均勻。
  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上。向康寧基底膜基質中加入細胞并使用預冷的移液管懸浮。以150-200 μl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質。
  3. 將培養(yǎng)板放置在 37°C，30 分鐘?，F(xiàn)在可以添加培養(yǎng)基了。細胞也可以培養(yǎng)在這一凝膠的頂部。

薄層包被法
  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質。使用預冷的移液管，將康寧基底膜基質混合至均勻。
  2. 使用無血清培養(yǎng)基將康寧基底膜基質稀釋到需要的濃度。對于您的應用程序，您應該完成以經(jīng)驗為主的研究來確定您的最·適包被濃度。
  3. 向被包被的容器中加入稀釋的康寧基底膜基質。加入的量應該足以容易地覆蓋整個生長表面。在室溫下培養(yǎng) 1 個小時。
  4. 吸出未結合的材料并使用無血清培養(yǎng)基輕柔地漂洗。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。

細胞復蘇：
  康寧中·性蛋白酶(貨號 354235)，康寧細胞復蘇溶液(貨號 354253)。使用康寧細胞復蘇溶液在冰上 7 小時內解聚康寧基底膜基質能夠實現(xiàn)將生長在康寧基底膜基質上的細胞最·有效地復蘇，或者使用中·性蛋白酶，考慮到連續(xù)培養(yǎng)，中·性蛋白酶作為一種金屬酶可以分散細胞。

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應用

康寧Matrigel基質可有效促進正常和轉化的貼壁依賴性上皮細胞以及其他類型細胞的粘附和分化，包括神經(jīng)元、支持細胞、雞晶狀體、血管內皮細胞以及肝細胞。

應用領域包括：

影響成年大鼠肝細胞基因表達

小鼠和人乳腺上皮細胞3D培養(yǎng)

體內外周神經(jīng)再生

代謝和毒理學研究

某些腫瘤細胞侵襲試驗的開發(fā)

體外和體內血管生成研究

人類腫瘤在免疫抑制小鼠體內擴增

人胚胎干細胞和誘導多能性干細胞 (hiPSc) 的維持

hiPS細胞的神經(jīng)元分化 

Matrigel基質質量控制規(guī)范

通過小鼠抗體產(chǎn)物 (MAP) 檢測進行常規(guī)小鼠菌落病原體篩選

不含LDEV的EHS腫瘤

對包括LDEV在內的多種病原體進行廣泛的PCR檢測，確保對生產(chǎn)過程中使用的原材料進行嚴格控制

經(jīng)過檢測，未發(fā)現(xiàn)細菌、真菌和支原體

通過Lowry方法測定蛋白濃度

通過鱟阿米巴樣細胞溶解物試驗測定內毒素水平

在37°C下進行14天凝膠穩(wěn)定性測試

利用神經(jīng)軸突生長試驗測定各批次的生物活性；將雞背根神經(jīng)節(jié)接種到1.0 mm厚的康寧Matrigel基質上，48小時后，在未添加神經(jīng)生長因子的情況下，神經(jīng)軸突生長實驗需呈陽性反應