產(chǎn)品名稱：BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品貨號(hào):  554657

英文名稱：Stain Buffer (BSA)

產(chǎn)品規(guī)格：500 mL

產(chǎn)品品牌：BD

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

BSA可用于淋巴組織、骨髓、外周血或培養(yǎng)細(xì)胞制備的單細(xì)胞懸液的免疫熒光染色。藥物染色緩沖液(BSA)用于熒光試劑的稀釋和應(yīng)用，以及用于流式細(xì)胞術(shù)分析(或熒光顯微鏡)的細(xì)胞的懸浮液、洗滌和存儲(chǔ)。根據(jù)前面對(duì)染色培養(yǎng)基的描述，我們將藥劑染色緩沖液(BSA)配制成中性pH (pH 7.4)緩沖鹽溶液(DPBS)，其中添加了0.2% (w/v)牛血清白蛋白(BSA)蛋白。因此，藥物染色緩沖液(BSA)旨在維持細(xì)胞活力，并最大限度地提高ph敏感熒光色素(如異硫氰酸熒光素(FITC))產(chǎn)生的熒光信號(hào)強(qiáng)度。藥物染色緩沖液(BSA)對(duì)于用生物素化的抗體和熒光標(biāo)記的親和素對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色是有用的，因?yàn)檫@種染色培養(yǎng)基不含生物素。當(dāng)游離生物素出現(xiàn)在染色介質(zhì)中時(shí)，它可以干擾熒光親和素與生物素化抗體的結(jié)合，這些抗體與同源的細(xì)胞相關(guān)抗原結(jié)合。此外，游離生物素可以與細(xì)胞結(jié)合，并有助于增加暴露于熒光偶聯(lián)親和素的細(xì)胞的非特異性背景染色。藥物染色緩沖液(BSA)含有代謝抑制劑NaN3。NaN3抑制抗體交聯(lián)引起的細(xì)胞表面抗原的潛在再分配(例如，由于脫落或內(nèi)化)。因此，NaN3(與維持低溫環(huán)境溫度相結(jié)合)可以防止后續(xù)流式細(xì)胞分析(或熒光顯微鏡)中免疫熒光染色細(xì)胞產(chǎn)生的熒光信號(hào)強(qiáng)度的潛在損失。

產(chǎn)品應(yīng)用:

流式細(xì)胞術(shù)(常規(guī)檢測(cè))、熒光顯微鏡、細(xì)胞內(nèi)染色(流式細(xì)胞術(shù))(發(fā)育期間檢測(cè))

運(yùn)輸與儲(chǔ)存：

保存在4°C未稀釋。

推薦的實(shí)驗(yàn)流程：

使用Pharmingen染色緩沖液(BSA)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行直接免疫熒光染色的程序。

1. 使用標(biāo)準(zhǔn)方案從淋巴組織、骨髓、外周血或細(xì)胞培養(yǎng)中制備單細(xì)胞懸液。

2. 在冷的Pharmingen染色緩沖液(BSA)中清洗細(xì)胞兩次，并通過離心將細(xì)胞制成顆粒(例如，在4°C下300 x g)。Resuspend細(xì)胞用冷Pharmingen染色緩沖液(BSA)制成顆粒，最終濃度為2 × 10e7細(xì)胞/ml。

3.將50µl等量的細(xì)胞懸液(10e6細(xì)胞)分配到試管或微孔板的圓底孔中。

4. 在Pharmingen染色緩沖液(BSA)中稀釋熒光抗體至預(yù)定的最佳濃度，并添加少量的等量(例如，10µl)稀釋抗體到含有目標(biāo)細(xì)胞懸液的試管或微孔。在冰上孵育20分鐘免受光。染色時(shí)間可能增加(≥45分鐘)取決于熒光抗體的熱情。

5. 用200µl(用于微孔板)或1ml(用于試管)的BSA清洗細(xì)胞兩次的抗體。每次離心后，小心地抽吸(對(duì)于微孔板或微孔管)或?qū)⒓?xì)胞顆粒上清倒置并吸干(管)。

6. 將細(xì)胞顆粒重懸在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于管)的Pharmingen染色緩沖液(BSA)中。轉(zhuǎn)移將細(xì)胞從微孔板上染色到適當(dāng)?shù)脑嚬苤羞M(jìn)行流式細(xì)胞分析(將最終體積調(diào)整到~0.5 ml)。

7. 染色后盡快(如≤4小時(shí))用流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡分析染色后的細(xì)胞樣本。如果必須延遲分析，然后染色細(xì)胞可以用緩沖多聚甲醛固定(例如，Cytofix Buffer和4°C保存(避光)。應(yīng)盡快對(duì)固定的細(xì)胞進(jìn)行分析(如染色和固定后一周)。

注1:Pharmingen染色緩沖液(BSA)同樣可以用于細(xì)胞的間接免疫熒光染色。在這種情況下，當(dāng)使用未標(biāo)記或生物素化一抗時(shí)，重復(fù)步驟4和步驟5。

注2:Pharmingen污點(diǎn)緩沖區(qū)(BSA)也可以用于immunofluorescent染色細(xì)胞表面抗原表達(dá)的注定要固定和immunofluorescently染色細(xì)胞因子等細(xì)胞內(nèi)抗原。在流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡分析之前，可在Pharmingen染色緩沖液(BSA)中重懸和維持細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色的細(xì)胞(例如，在4°C下，保護(hù)光線)

產(chǎn)品訂購信息：

貨號(hào)                       名稱                       規(guī)格

554657   BD   stain buffer 含BSA     500mL

產(chǎn)品名稱：BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品貨號(hào):  554657

關(guān)于公司：

BD 多色流式細(xì)胞術(shù)提供了各種目標(biāo)細(xì)胞亞群的快速、多參數(shù)分析。其應(yīng)用包括免疫學(xué)、免疫腫瘤學(xué)、病毒學(xué)、免疫監(jiān)測(cè)等。

BD Biosciences開發(fā)了跨越每條激光線的創(chuàng)新染料，以提供多色實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)靈活性和全面的偶聯(lián)抗體組合，幫助深度表征表面、細(xì)胞內(nèi)或分泌標(biāo)記物。從簡(jiǎn)單到復(fù)雜研究應(yīng)用的流式細(xì)胞儀和分選儀，到廣泛的試劑選擇和教育資源、工具和方案的全面收集，我們支持您有效地管理多色流式細(xì)胞儀工作流程。

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